| 產(chǎn)品名稱 |
人乳腺癌組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4277 |
| 組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的乳腺癌組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分類(lèi) |
1、非浸潤(rùn)性癌：指癌瘤最早階段，病變局限于乳腺導(dǎo)管或腺泡內(nèi)，未突破基底膜時(shí)稱非浸 潤(rùn)癌。 （1）小葉原位癌：起源于小葉導(dǎo)管及未梢導(dǎo)管上皮癌，約占乳腺癌的1.5%。切面呈粉紅色 半透明稍硬顆粒狀區(qū)，病變大多呈多灶性，癌細(xì)胞體積較大，形態(tài)一致，但排列紊亂，導(dǎo)管 周?chē)啄ね暾＠奂半p側(cè)，發(fā)展緩慢。 （2）導(dǎo)管內(nèi)癌：發(fā)生于中心導(dǎo)管的原位癌，病變可累及導(dǎo)管范圍廣或呈多中心，散在分布， 切面呈顆粒狀帶灰白或淡黃色小點(diǎn)，猶如皮膚粉刺樣內(nèi)容物。 2、早期浸潤(rùn)癌： （1）早期浸潤(rùn)小葉癌：小葉原位癌穿過(guò)基底膜，向小葉內(nèi)間質(zhì)浸潤(rùn)，但尚未浸潤(rùn)至小葉范 圍之外。 （2）早期浸潤(rùn)導(dǎo)管癌：導(dǎo)管內(nèi)癌少量癌細(xì)胞突破導(dǎo)管基底膜，向間質(zhì)浸潤(rùn)，但浸潤(rùn)范圍小。 3、浸潤(rùn)性癌 癌組織向間質(zhì)內(nèi)廣泛浸潤(rùn)，形成各種形態(tài)癌組織與間質(zhì)相混雜的圖像。浸潤(rùn)型癌又分為浸潤(rùn) 性特殊型癌和浸潤(rùn)性非特殊型癌。浸潤(rùn)性非特殊型癌又根據(jù)癌組織和間質(zhì)比例多寡分為：?jiǎn)?純癌、硬癌、髓樣癌。 （1）浸潤(rùn)性非特殊型癌： ①單純癌：較多見(jiàn)，約占乳腺癌一半以上。癌組織主質(zhì)和間質(zhì)成分接近，癌細(xì)胞常集聚成小 巢，片狀或粗索狀。 ②硬癌：約占乳腺癌總數(shù)10%左右，癌主質(zhì)少，間質(zhì)多為特點(diǎn)。體積小，質(zhì)地硬，切面瓷 白色，癌邊緣呈蟹足狀向周?chē)?rùn)。 ③髓樣癌：約占乳癌總數(shù)10～20%，癌組織主質(zhì)為多，間質(zhì)少。瘤體可達(dá)巨大體積，切面 灰白色，中心部常有壞死。根據(jù)間質(zhì)中淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度的不同，可分為兩個(gè)亞型：淋巴細(xì) 胞浸潤(rùn)少的為非黃型髓樣癌，浸潤(rùn)多者為典型髓樣癌。后者預(yù)后好，常劃入特殊型浸潤(rùn)癌內(nèi)。（2）浸潤(rùn)性特殊型癌 ①乳頭狀癌：大導(dǎo)管內(nèi)癌，極少由大導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤演變來(lái)。多見(jiàn)于50～60 歲婦女，腫塊 單發(fā)或多發(fā)，部分有乳頭溢液，大多血性，溢液涂片可找到癌細(xì)胞。切面呈棕紅色結(jié)節(jié)，質(zhì) 脆，結(jié)節(jié)內(nèi)有粉紅色腐肉樣或乳頭狀組織。此癌生長(zhǎng)緩慢，轉(zhuǎn)移也較晚。當(dāng)癌實(shí)質(zhì)一半以上 表現(xiàn)為腺管樣結(jié)構(gòu)時(shí)，可診斷為腺癌。 ②粘液腺癌：又名膠樣癌，較少見(jiàn)。發(fā)病年齡大，生長(zhǎng)緩慢，境界清楚，切面半透明膠凍樣 物，癌組織中含有豐富粘液，惡性程度較低，腋下淋巴轉(zhuǎn)移較少見(jiàn)。 ③濕疹樣癌：又稱乳腺派杰氏病。此癌形態(tài)上特征為：乳頭、乳暈皮膚呈濕疹樣改變和表皮 內(nèi)出現(xiàn)一種大而有特征性的派杰氏細(xì)胞。此癌多數(shù)合并導(dǎo)管內(nèi)癌和小葉原位癌，部分為浸潤(rùn) 性導(dǎo)管癌等。 |
