大鼠嗜堿性細胞白血病細胞(RBL-2H3)介紹:大鼠嗜堿性細胞白血病細胞(RBL-2H3)是1978 年國立牙科研究所的免疫學實驗室從Wistar 大鼠保持腫瘤狀態的嗜堿性細胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細胞株。這些細胞具有高親和力的IgE 受體。通過集聚這些受體或與鈣離子載體協同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質。大鼠嗜堿性細胞白血病細胞(RBL-2H3)廣泛地用于研究肥大細胞FcERI 和分泌的生化途徑。RBL-2H3 細胞是研究FcERI 結構的模型。它們廣泛地用于研究細胞分泌的不同方面，包括細胞內鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G 蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS 都支持細胞的生長，但在某些批號中FcERI 集聚后脫粒化得更好。另一株大鼠嗜堿性細胞株(RBL，ATCC CRL-1378)不會脫粒化。

大鼠嗜堿性細胞白血病細胞(RBL-2H3)特性:

1） 來源：大鼠外周血

2） 形態：成纖維細胞

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T25 瓶或者1mL 凍存管包裝

運輸和保存：使用含有優質胎牛血清的2ml 凍存管發送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min 后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養基后轉移至10cm 培養皿或者T25 培養瓶中培養，傳代細胞達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

大鼠嗜堿性細胞白血病細胞(RBL-2H3)用途：僅供科研使用。

大鼠嗜堿性細胞白血病細胞(RBL-2H3)培養步驟:

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備MEM 培養基(MEM， GIBCO，貨號41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉0.11g/L)，85%；優質熱滅活胎牛血清，15%，添加1% PS。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37 攝氏度。

3）凍存液：90%完全培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。

二．細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL 細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL 培養基混合均勻。在1000RPM 條件下離心4 分鐘，棄去上清液，補加1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm 皿中，加入約8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS 潤洗細胞1-2 次。

2. 加2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM 條件下離心4 分鐘，棄去上清液，補加1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2 到1：5 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml 含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO 后進行凍存。

注意事項：

1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。