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人紅系白血病細胞 (TF-1)

人紅系白血病細胞(TF-1)介紹:人紅系白血病細胞(TF-1)1987 年由Kitamura T 等建立,源于一名35 歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本,該患者具有嚴重的全血細胞減少癥。細胞生長完全依賴于IL-3 GM-CSFIL-5 無反應。多種淋巴因子和細胞因子對該細胞都有作用,如:IL-1IL-4IL-6IL-9IL-11IL-13CSFLIFNGF人紅系白血病細胞(TF-1)不表達血型糖蛋白A 和碳酸酐酶I由該細胞的形態和細胞化學特征及珠蛋白基因的組成性表達,顯示該細胞屬于紅系。氯高鐵血紅素和δ氨基乙酰丙酸誘導細胞合成血紅蛋白,TPA 刺激細胞向巨噬細胞樣細胞分化。

人紅系白血病細胞(TF-1)特性:

1) 來源:白血病細胞

2) 形態:淋巴母細胞,懸浮生長

3) 含量:>1x106 /mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規格:T25 瓶或者1mL 凍存管包裝

運輸和保存:使用含有優質胎牛血清的2ml 凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min 后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養基后轉移至10cm 培養皿或者T75 培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

人紅系白血病細胞(TF-1)用途:僅供科研使用。

人紅系白血病細胞(TF-1)培養步驟:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640 培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091)90%;優質胎牛血清,10%

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37 攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

3)凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二.細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL 細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4mL 培養基混合均勻。在1000RPM 條件下離心4 分鐘,棄去上清液,補1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm 皿中,加入約8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM 條件下離心4 分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按12 15 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按12 13 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM 條件下離心4 分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

注意事項:

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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